動物性食品中氟苯尼考及氟苯尼考胺殘留量的測定GB 31658.5-2021

氟苯尼考是一種抗生素類藥物，具有安全高效、廣譜抗菌等特點，被廣泛應(yīng)用于治療禽、豬、牛等動物的菌性疾病。氟苯尼考在動物體內(nèi)的主要殘留物是氟苯尼考胺，也有氟苯尼考草氨酸和氟苯尼考醇等一些其他代謝物。

本實驗參考GB 31658.5-2021《動物性食品中氟苯尼考及氟苯尼考胺殘留量的測定》標(biāo)準(zhǔn)，建立了SPE-UPLC-MS/MS法測定動物性食品中氟苯尼考及氟苯尼考胺的殘留量。

一、樣品提取

稱取試樣2.0 g（精確至0.02 g）于50 mL離心管中，加入氘代氯霉素內(nèi)標(biāo)100 μL，渦旋混勻，靜置15 min，加入乙酸乙酯-氨水溶液10 mL，渦旋1 min，3000 r/min離心5 min，取上清液于另一支50 mL離心管中，殘渣重復(fù)提取2次，合并3次提取液。

離心管中加入5%乙酸2 mL，振搖混勻，于40 ℃水浴中濃縮至1.5 mL，加入5%乙酸2 mL ，加正己烷5 mL脫脂，渦旋1 min，3000 r/min離心5 min，棄上層，下層提取液重復(fù)脫脂一次，待凈化。 

二、樣品凈化

活化：依次用2 mL甲醇和2 mL水活化MCX小柱；

上樣：取待凈化液過柱；

淋洗：用2 mL 5%乙酸淋洗；

洗脫：用5 mL 10%氨甲醇洗脫，收集洗脫液，于40℃氮氣吹干；

重新復(fù)溶：加入500 μL 30%乙腈水溶液復(fù)溶，漩渦，濾膜過濾，上機測試。

三、 標(biāo)曲配制

稱取6個試樣同樣品處理流程處理（不加內(nèi)標(biāo)），收集洗脫液后于40℃氮氣吹干，作為空白基質(zhì)。

準(zhǔn)確移取一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)液加入到空白基質(zhì)底液中，同時加入100 ng/mL氘代氯霉素內(nèi)標(biāo)溶液100 μL，加入30%乙腈溶液溶解至0.5 mL，配制成濃度為5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL，渦旋混勻過濾膜，上機測試。

四、 儀器條件

液相部分

色譜柱：Hypersil GOLD C18(2.1 mm×100 mm,1.9 μm)

流動相：A：水  B：乙腈

流速：0.25 mL/min   

柱溫：35℃   

進樣量：10 μL

洗脫程序：梯度洗脫表1

質(zhì)譜條件

離子源：HESI           電噴霧電壓：3500 V

鞘氣壓力：40 arb      輔氣壓力：10 arb

離子傳輸管：380 ℃   輔氣溫度：350 ℃

五、實驗結(jié)果

5.1測試數(shù)據(jù)

5.2測試色譜圖

六、訂購信息